伴刀豆球蛋白A 来源于洋刀豆 (刀豆)

NA.32

用适当的过氧化物酶底物检测含有α-D-甘露糖、α-D-葡萄糖的糖蛋白
通用Western Blot实验方法：

• 糖蛋白样品规格：500ng
• 凝集素浓度：0.1ug/ml

1. 每条泳道上样500 ng糖蛋白样品
2. 进行4-20% Bis-Tris SDS page凝胶
3. 转膜至PVDF膜上
4. 用于RIPA缓冲液(R0278 Sigma)在室温对膜进行封闭1小时
5. 在室温用RIPA缓冲液以0.1 ug/ml孵育HRP凝集素2小时
6. 用25ml RIPA缓冲液洗膜 5 x 5分钟
7. 用化学发光底物(CPS1-120)进行检测

刀豆素 A 无血型特异性，但对末端 α-D-甘露糖基和 α-D-葡糖基残基具有亲和力。需要 Ca²⁺ 和 Mn²⁺ 离子存在才能显示活性。刀豆素 A 在 pH 6.5 或更低的条件下解离为二聚体。pH 在 5.8 至 7.0 之间时，刀豆素 A 以四聚体形式存在；pH 高于 7.0 时，形成更高的聚合体。根据聚合程度不同，刀豆素 A 可能显示出具有促有丝分裂的活性。琥珀酰化可以生成一种能够在 pH 高于 5.6 时仍保持二聚体形式的活性二聚体。

一单位在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从邻苯三酚形成1 mg的红棓酚。

含有柠檬酸三钠缓冲盐和微量钙和锰的冻干粉末

使用Wilson和Nakane的方法从VI型过氧化物酶(P8375)制备而得，其可促进耦合但能防止Con A和过氧化物酶糖残基之间的相互作用。

在报道中，凝集活性以μg/ml表示，并且是在含有1mg/mL Ca ²⁺和Mn ²⁺的磷酸盐缓冲盐水(pH 6.8)的系列稀释液中进行测定的。该活性是在25℃孵育1小时后，对2％人红细胞悬浮液进行凝集所需的最低浓度。

200

Canavalia ensiformis (jack bean)

peroxidase conjugate

lyophilized powder

blood typing: suitable
fractionation: suitable

carbohydrate, essentially free

−20℃

包装规格取决于蛋白质含量

GHS08

Danger

H317 - H334 - H361

P201 - P202 - P280 - P302 + P352 - P304 + P340 + P312 - P308 + P313

Repr. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 3

Eyeshields, Faceshields, Gloves, type P1 (EN143) respirator filter, type P3 (EN 143) respirator cartridges