过氧化物酶 来源于辣根

1.11.1.7 ( BRENDA | IUBMB )

232-668-6

MFCD00071339

32160410

NA.54

辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca²⁺ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

Horseradish peroxidase (HRP) is isolated from horseradish roots (Amoracia rusticana). It is used in biochemistry applications such as western blots, ELISA and Immunohistochemistry. Horseradish peroxidase is used to amplify a weak signal and increase detectability of a target molecule, such as a protein. Product P6782 is type VI-A and it is essentially a salt-free, lyophilized powder. It is used to quantify cholesterol and cholesterol esters and to study in vitro lipid deposition on hydrogel and silicone hydrogel contact lenses.
Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器，以便检测半乳糖。它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)的培养基(MRS琼脂板)的组分，用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H₂O₂ 催化分解为O₂，并且TMB在O₂存在下将菌落染成蓝色。因此，在含5% CO₂ 的空气环境下孵育48小时后，MRS琼脂上产生H₂O₂ 的菌落呈深蓝色。不产生H₂O₂ 的菌落仍为无色。它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。它还被用于测定溶液中的葡萄糖 和过氧化物 。

HRP容易与过氧化氢(H₂O₂)结合，生成的[HRP-H₂O₂]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5，在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此，它是最理想的标记物。同时，其糖基化会产生较低的非特异性结合。已有研究发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸以及 Cd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺和Pb²⁺离子可抑制该酶活性。
辣根过氧化物酶与底物一起孵育时，产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物，以便可以定量。 辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。

与P8375相似

一个ABTS单元将在25℃、pH 5.0条件下每分钟氧化1 μM的ABTS
一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

本品以1 mg/mL的浓度溶于0.1 M磷酸盐缓冲液(pH 6.0)中，可在室温下保持活性至少两周。该溶液在5次冻融循环后仍保留活性。

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A₄₀₃/A₂₇₅ 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
本品使用ABTS测定，以便与其他供应商的单位进行比较：每mg固体约1,000单位

有关 过氧化物酶 的更多信息，请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer。

Type VI-A

300

essentially salt-free, lyophilized powder

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
950-2000 units/mg solid (using ABTS)

~44 kDa

0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
H₂O: soluble

diagnostic assay manufacturing

2-8℃

5 mg in glass bottle
10, 25 mg in poly bottle
50, 100 mg in glass bottle
包装单位为mg固体

GHS08

Danger

H317 - H334

P261 - P272 - P280 - P284 - P302 + P352 - P333 + P313

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 3

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)