碱性磷酸酶 来源于牛肠粘膜

3.1.3.1 ( BRENDA | IUBMB )

MFCD00131849

42010105

NA.54

推荐用于抗体和蛋白质缀合的高比活性等级。
碱性磷酸酶可与抗体和其他蛋白质偶联，用于ELISA、蛋白质免疫印迹和组织化学检测。 它通常用于蛋白质(如酪蛋白)和核酸的去磷酸化。 当需要高灵敏度时，它可用于蛋白质标记。 碱性磷酸酶也可用于使DNA或RNA的5′-末端去磷酸化，从而防止自身连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA或RNA还可被放射性标记磷酸盐标记(通过T4多核苷酸激酶)。 产品P6774已可用于制备脑裂解物。
Sigma的碱性磷酸酶已可用于制备AP-BGG(碱性磷酸酶-牛γ球蛋白)偶联物。在免疫学测定中，它已经与绵羊抗兔IgG和绵羊抗兔IgM偶联。它还被用于制备HRP标记的双酶偶联物，用于同时检测单个组织切片中的三种不同细胞内Ig决定簇。
碱性磷酸酶可用于酪蛋白和其他蛋白质的去磷酸化。碱性磷酸酶还可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端的去磷酸化，以防止自我连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记(通过 T4 多核苷酸激酶)。

来自牛肠粘膜的碱性磷酸酶在pH 7.5-9.5范围内最稳定。该酶对醇、胺、焦磷酸盐和酚的磷酸酯具有广泛的特异性，并且需要锌和镁或钙二价离子才能发挥活性。
该酶对醇类、胺类、焦磷酸盐以及酚类的磷酸酯具有广泛的特异性。常用于蛋白质和核酸的去磷酸化。
该酶是一种糖蛋白，含有约12％的碳水化合物(6％己糖和6％其他中性糖)。每个碱性磷酸酶分子含有四个锌原子和四个二硫键。在镁存在下，碱性磷酸酶可达到最大活性。它能催化磷酸单酯的水解，例如对硝基苯磷酸酯，苯基磷酸酯，酚酞磷酸酯，α-甘油磷酸酯，β-甘油磷酸酯，2-磷酸甘油酯，磷酸丙糖酯，葡萄糖-6-磷酸酯，葡萄糖-1-磷酸酯，果糖-1-磷酸盐，果糖-6-磷酸盐，腺苷5-磷酸腺苷-3-磷酸酯，磷酸烯醇丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯。砷酸盐、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐、磷酸二异丙酯、磷酸三苯酯、氟代磷酸二异丙酯和L-苯丙氨酸是碱性磷酸酶的强抑制剂。

牛肠碱性磷酸酶为二聚膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶，每个单体通常拥有两个 N-连接多糖和一个或多个 O-连接多糖。2 该酶需要锌以及镁或钙二价离子才能显示活性。
牛肠道碱性磷酸酶是一种二聚化的膜衍生糖蛋白。其存在至少三种异构体，每个单体通常具有两个N-连接的和一个或多个O-连接的聚糖。
牛肠碱性磷酸酶是一种二聚体形式的膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶，每个单体通常具有两个N-连接的多糖和一个或多个O-连接的聚糖。

在pH 9.8,37℃条件下，一个DEA单位可每分钟水解1 μmole的4-硝基苯基磷酸酯。(一个甘氨酸单位相当于~3个DEA单位)

溶剂为3.0 M NaCl，含 5 mM MgCl₂、0.2 mM ZnCl₂和30 mM三乙醇胺，pH 7.6

亲和纯化

包装规格取决于 DEA 单位
通过缩二脲法测定的蛋白质。

buffered aqueous solution

200

≥2,000 DEA units/mg protein

dimer ~160 kDa

5-20 mg/mL

2-8℃

1000, 2000, 10000, 50000 units in poly bottle

10 - Combustible liquids

WGK 3

Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)