质粒DNA 来源于大肠杆菌 RRI

MFCD00166896

NA.85

pUC19 质粒 (2686 bp) 赋予 β-内酰胺酶氨苄西林抗性和补体缺陷-适当宿主菌株中的半乳糖苷酶。多克隆站点 (MCS) 位于 β-半乳糖苷酶基因内；该质粒在 MCS 中有 13 个独特的位点(Acc I、BamH I、EcoR I、Hinc II、Hind III、Kpn I、Pst I、Sac I、Sal I、Sma I、Sph I、Xba I 和 Xma I)。

来自 大肠杆菌 RRI 的质粒 DNA 通过原子力显微镜用于 DNA(纳米结构)成像。

在合适的宿主菌株中，这些质粒赋予氨苄青霉素抗性并补充 β-半乳糖苷酶中的缺陷。多克隆位点(MCS)位于 β-半乳糖苷酶基因内；pUC8 和 9 在 MCS 中有 9 个独特位点，而 pUC18 和 19 在 MCS 中有 13 个位点。
插入 MCS 的外源 DNA 消除了乳糖分解的能力 。乳糖阳性、氨苄青霉素抗性菌落(含有质粒的宿主菌株)在含有氨苄青霉素和 X-Gal 的平板上形成蓝色菌落；乳糖阴性、氨苄青霉素抗性菌落(宿主菌株，含有在 MCS 处插入外源 DNA 的质粒)在该培养基上形成白色菌落。pUC 质粒中 MCS 区域的取向与相应的 M13 噬菌体相似。

pUC19 质粒 DNA,10μg 的浓度约为 0.5 mg/mL，溶于含 1 mM EDTA 的 10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 中。

在 MCS 插入的外源 DNA 打断了 β-半乳糖苷酶基因，消除分解代谢乳糖的能力。乳糖阳性、氨苄西林耐药菌落(含质粒的宿主菌)在含氨苄西林和 X-Gal 的平板上形成蓝色菌落；乳糖阴性、氨苄西林耐药菌落(含有质粒、外源 DNA 插入 MCS 的宿主菌)在该培养基上形成白色菌落。

200

for molecular biology

buffered aqueous solution

dry ice

−20℃

10 - Combustible liquids

WGK 1