蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

3.4.21.64 ( BRENDA | IUBMB )

MFCD00132129

NA.54

来源于白色念球菌(Tritirachium album)的蛋白酶K已被用于：

• 牛子宫内膜上皮细胞疱疹病毒DNA的提取
• 从鼻拭子中提取病毒RNA
• 作为锁相和直接PCR裂解缓冲液的成分

在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
该产品已被用于研究其对丝素蛋白的预处理效果。该研究对羟基磷灰石(HAp)的晶体学性质，以及复合材料的微观结构和显微硬度进行了分析。该酶还可用于利用FISH技术促进探针对rRNA的标记，从而对致病性 金黄色葡萄球菌进行检测。

蛋白酶K具有广泛的特异性，即使在天然状态下也可降解许多蛋白质。它主要切割脂肪族和芳香族氨基酸(带有封闭的α-氨基)的羧基相邻的肽键。根据氨基酸序列，蛋白酶K的分子量为28,930Da 根据SDS-PAGE，其分子量为28,500Da。最适pH值在7.5-9.0之间 其等电点为8.9。其需要Ca²⁺(1-5mM)进行激活。蛋白酶K可被DIFP(二异丙基氟磷酸盐)或PMSF(苯甲基磺酰氟)抑制。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

在pH7.5,37℃条件下，一个单位每分钟可将尿素变性血红蛋白水解并生成相当于1.0 μmole酪氨酸的颜色(利用Folin-Ciocalteu试剂进行显色)。

溶于含有10mM Tris-HCl(pH 7.5)和1mM乙酸钙的40％甘油(v / v)溶液中。

PicoGreen is a registered trademark of Life Technologies

200

for molecular biology

buffered aqueous glycerol solution

28.93 kDa

≥10 mg/mL
≥800 units/mL

≤0.5 ppm DNA (PicoGreen^® assay)

DNase, Nickase and RNase, none detected

2-8℃

GHS08

Danger

H334

P261 - P284 - P501

Resp. Sens. 1

10 - Combustible liquids

WGK 1

Eyeshields, Faceshields, Gloves, type ABEK (EN14387) respirator filter