蛋白印迹封闭试剂，溶液

solution

100

sufficient for 10 blots (11921673001 [100 cm²])
sufficient for 60 blots (11921681001 [100 cm²])

pkg of 100 mL (11921673001)
pkg of 6 × 100 mL (11921681001)

Roche

wet ice

2-8℃

在蛋白质印迹实验和免疫荧光染色期间，Western Blocking Reagent(Western 封闭液)可用作通用封闭液。该试剂用于膜封闭、膜洗涤和稀释检测抗体等步骤中。

每个批次都经过功能测试(斑点印迹)。

Western Blocking Reagent(Western 封闭液)是一种 10x 浓缩液，它含有 10％ 纯化的酪蛋白，溶解于马来酸缓冲液中。

工作溶液：制备工作溶液

• Tris 缓冲液(TBS)，pH 7.5

在 800 ml 双蒸水中添加 6.05g Tris 碱(50mM)和 8.76g 氯化钠(150mM)，并用约 9.5 ml 1M 盐酸调节 pH 值至 7.5。然后用双蒸水稀释至 1L。在 2-8℃ 下，TBS 可稳定储存 3 个月。
注意：叠氮化钠对 POD 有抑制作用，因此在使用 POD 复合物时，不得将叠氮化钠用作抗菌剂。

• TBS-Tween(TBST)

洗涤缓冲液 1：将 1 ml Tween 20 溶于 1L TBS 中。在 2-8℃ 下，TBST 可稳定储存 3 个月。
注意：0.1％ Tween 20 适用于大多数应用，但具体取决于所用的膜和抗体 - 不同的表面活性剂(如SDS、Triton X-100 和 Nonidet P40)，以及表面活性剂浓度在 0.01 至 1％ 之间可以产生更好的结果。

• 封闭液(1％)

使用 90ml TBS 稀释 10ml Western 封闭液(10x 浓缩液)。在 2-8℃ 下，封闭液可储存 1 个月。
注意：叠氮化钠对 POD 有抑制作用，因此在使用 POD 复合物时，不得将叠氮化钠用作抗菌剂。

• 封闭液(0.5％)

使用 50ml TBS 溶液稀释 50ml 封闭液(1％)。

• 抗体溶液

所有抗体的稀释液和孵育液是封闭液(0.5％)(用 TBS 溶液稀释)(见上文)。为了让检测效果达到最佳状态，我们建议在进行蛋白质印迹实验之前，先优化一抗和二抗的稀释浓度。(首先使用稀释 3 至 4 倍的一抗和恒定浓度的二抗。然后选择最合适的一抗稀释液，并以相同的方式优化二抗浓度。)
注意：封闭液的浓度是改善蛋白质印迹信噪比的重要参数。如果优化了抗体浓度之后，背景仍然较高，则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度从 0.5％ 增加至 1％。如果即便延长了抗体孵育时间，信号仍然较弱，则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度也从 0.5％ 降低至 0.1％。

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

12 - Non Combustible Liquids

WGK 1